EB: EB (бромид этидия, бромид)
Бромид этидия представляет собой высокочувствительный флуоресцентный краситель, используемый для наблюдения ДНК в агарозных и полиакриламидных гелях. Бромид этидия Наиболее распространенным способом наблюдения за ДНК в агарозных гелях является окрашивание их флуоресцентным красителем бромидом этидия, который содержит трициклическую плоскую группу, которая может быть встроена между накопленными основаниями ДНК.
Бромид этидия – сильный мутагенный агент с высокой канцерогенностью! Он испаряется при 60-70°С (поэтому лучше не добавлять его, когда клей слишком горячий, либо добавлять в жидкость, 0,5 мкг/мл, красить в течение получаса) (При избыточном ЭБ Кроме того, окрашенный гель можно также замочить в воде при комнатной температуре на 20 минут, чтобы уменьшить фоновую флуоресценцию, вызванную несвязанным ЭБ).
Очистка раствора бромида этидия: поскольку бромид этидия обладает определенной токсичностью, после окончания эксперимента раствор, содержащий ЭБ, следует очистить и утилизировать, чтобы избежать загрязнения окружающей среды и нанесения вреда здоровью человека.
(1) Для раствора с содержанием ЭБ более 0,5 мг/мл его можно обработать следующим образом:
① Разбавьте раствор ЭБ водой до концентрации менее 0,5 мг/мл;
② Добавьте 0,5 моль/л KMnO4, хорошо перемешайте, затем добавьте равное количество 25 моль/л HCl, хорошо перемешайте и оставьте при комнатной температуре на несколько часов;
③ Добавьте 2,5 моль/л NaOH за один раз, хорошо перемешайте и выбросьте.
(2) Раствор с содержанием ЭБ менее 0,5 мг/мл можно обрабатывать следующим образом:
① Добавьте активированный уголь в дозе 1 мг/мл, время от времени осторожно встряхивайте и перемешивайте, а затем поместите при комнатной температуре на 1 час;
② Отфильтруйте через фильтровальную бумагу и запечатайте активированный уголь фильтровальной бумагой перед тем, как выбросить.